[صفحه اصلی ]   [Archive] [ English ]  
:: صفحه اصلي :: درباره نشريه :: آخرين شماره :: تمام شماره‌ها :: جستجو :: ثبت نام :: ارسال مقاله ::
:: دوره 8، شماره 2 - ( بهار 1399 ) ::
دوره 8 شماره 2 صفحات 82-92 برگشت به فهرست نسخه ها
تولید و بررسی آنتی‌بادی پلی‌کلونال موشی علیه انتروتوکسینB استافیلوکوکوس اورئوس
زینب نجمی، سهیل قاسمی، روح ا. . قلندری، فتاح ستوده نژاد نعمت اللهی*
گروه زیست شناسی، دانشکده علوم پایه، واحد علوم و تحقیقات دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران ، fattah212@gmail.com
چکیده:   (136 مشاهده)
مقدمه: استافیلوکوک اورئوس یک میکروارگانیسم مهم است که با ترشح فاکتورهایی که به‌عنوان سوپر آنتی‌ژن استافیلوکوک شناخته می‌شوند، باعث ایجاد بیماری‌های مختلف در انسان می‌شود. انتروتوکسینB  استافیلوکوکوس اورئوس یک آنتی‌ژن باکتریایی است که مسئول مسمومیت غذایی در انسان می‌باشد. برای تولید آنتی‌بادی‌های پلی‌کلونال، آنتی‌ژن مربوطه به یک حیوان حساس تزریق می‌شود و سرم محتوی آنتی‌بادی از آن استخراج می‌شود. سوپر آنتی‌ژن‌های باکتری که فعال‌کننده سلول‌های T قوی هستند می‌توانند بر روی سیستم عصبی مرکزی اثرات حاد یا مزمن داشته باشند. این تحقیق با هدف تولید آنتی‌بادی پلی‌کلونال موشی علیه انتروتوکسین B استافیلوکوکوس اورئوس انجام شده است. مواد وروش‌ها: برای تعیین غلظت پروتئین از روش بردفورد استفاده شد. برای ارزیابی و شناسایی آنتی‌ژن، نمونه‌ها از ژل SDS-PAEG بر روی غشاء نیترو سلولزی انتقال داده شد و توسط وسترن بلات آنالیز صورت گرفت. ایمن‌سازی موش‌ها در فواصل صفر، دو هفته و چهار هفته به صورت تزریق داخل صفاقی انجام شد. تیتر آنتی‌بادی در آنتی‌سرم جدا شده از حیوان به روش الایزا اندازه‌گیری شد. یافته‌ها: غلظت‌های مختلف پروتئین (32-0 میکروگرم) با جذب‌های مختلف با فرمول y = 0.0279x + 0.1222 محاسبه شد. در ژل آکریل آمید پروتئین باند اضافه دیده نشد. در تجزیه و تحلیل وسترن بلات باندهای حاصل همگی بیانگر تطابق کامل با نمونه استاندارد بوده و عاری از هر گونه پروتئین‌ ناخواسته بود. نتایج آزمایش الایزا در نوبت دوم در 0/05> P معنی‌دار بود. در آزمایش دابل دیفیوژن بین نمونه شاهد و آنتی‌ژن باند وجود داشت. نتیجه‌گیری:‌ توکسوئید تهیه شده خاصیت کشندگی خود را به طور کامل از دست داده و بنابراین می‌تواند برای ایمن‌سازی و تولید آنتی‌بادی پلی‌کلونال علیه انتروتوکسینB  استافیلوکوکوس استفاده شود.
واژه‌های کلیدی: استافیلوکوکوس، آنتی‌‌بادی، سیستم عصبی مرکزی
متن کامل [PDF 1106 kb]   (19 دریافت)    
نوع مطالعه: پژوهشي | موضوع مقاله: تحقیقات پایه در علوم اعصاب
فهرست منابع
1. Balaban N, Rasooly A. Staphylococcal enterotoxins. Int J Food Microbiol. 2000; 61: 1-10. [DOI:10.1016/S0168-1605(00)00377-9]
2. Tomi NS, Kranke B, Aberer E. Staphylococcal toxins in patients with psoriasis, atopic dermatitis, and erythroderma, and in healthy control subjects. J Am Acad Dermatol. 2005; 53: 67-72. [DOI:10.1016/j.jaad.2005.02.034]
3. Atanassova V, Meindl A, Ring C. Prevalence of staphylococcus aureus and staphylococcal enterotoxins in raw pork and uncooked smoked ham-a comparison of classical culturing detection and rflp-pcr. Food Microbiol. 2001; 68: 1-2. [DOI:10.1016/S0168-1605(01)00479-2]
4. Abbasi S, Taei S, Zamanzad B. The prevalence of methicillin-resistant staph. Aureus Strains Producing Enterotoxin A and B. Tehran University Medical. 2015; 11: 73.
5. Al-Daccak R, Mehindate K, Damdoumi F, Etongué-Mayer P. Staphylococcal enterotoxin D is a promiscuous superantigen offering multiple modes of interactions with the mhc class ii receptors. J Immunol. 1998; 160(1): 225-32.
6. Akineden O, Hassan Aa, Schneider E, Usleber E. Enterotoxigenic properties of staphylococcus aureus isolated from goats' milk cheese. Food Microbiol. 2008; 124(2): 211-6. [DOI:10.1016/j.ijfoodmicro.2008.03.027]
7. Balaban N. Rasooly A. Staphylococcal Enterotoxins. Int J Food Microbiol. 2000; 61(1): 1-10. [DOI:10.1016/S0168-1605(00)00377-9]
8. Verreault D, Ennis J, Whaley K, Z Killeen S, Karauzum H, Aman MJ, et al. Effective treatment of staphylococcal enterotoxin B (Seb) aerosol intoxication in rhesus macaques using two parentally-administered high affinity monoclonal antibodies. Antimicrob Agents Chemother. 2019; 63(5): e02049-18. doi: 10.1128/AAC.02049-18. [DOI:10.1128/AAC.02049-18]
9. Stiles BG, Bavari S, Krakauer T, Ulrich RG. Toxicity of staphylococcal enterotoxins potentiated by lipopolysaccharide: major histocompatibility complex class ii molecule dependency and cytokine release. Infect Immun. 1993; 61(12): 5333-8. [DOI:10.1128/IAI.61.12.5333-5338.1993]
10. Drake CG, Kotzin BL. Superantigens: biology, immunology, and potential role in disease. Journal of Clinical Immunology. 1992; 12(3): 149-62. [DOI:10.1007/BF00918083]
11. Stephen JD, Bellsteven M, Vroegopstephen EB. Early activation and cell trafficking induced by staphylococcal enterotoxin b: effects of high- versus low-dose challenge on induction of anergy. Cellular Immunology. 1994; 154(2): 440-52. [DOI:10.1006/cimm.1994.1090]
12. Saeed AI, RIEDER SA, Price Rl, Barker J, Nagarkatti P, Nagarkatti M. acute lung injury induced by staphylococcal enterotoxin b: disruption of terminal vessels as a mechanism of induction of vascular leak. Microscopy and Microanalysis. 2012; 18(3): 445-52. [DOI:10.1017/S1431927612000190]
13. Kitano K, Fukuda Y, Nagahira K, Nasu T, Noguchi C, Izumi R, et al. Production of polyclonal antibody specific for human natriuretic peptide receptor B. J Immunol Methods. 1996; 194(2): 147-53. [DOI:10.1016/0022-1759(96)00075-0]
14. Maneian M, Zarkesh Esfahani SH, Akbari M, Khanahmad H, Masjedi M. Production of polyclonal antibody against recombinant growth hormone and designing an elisa kit and comparing some of its diagnostics indices with a commercial kit. Journal of Isfahan Medical School. 2013; 31(247): 1173-84.
15. Majidi J, Abdolalizadeh J, Amirkhiz MB, Majidi S. Production and purification of polyclonal antibody against bovine immunoglobulins in rabbits. African Journal of Biotechnology. 2007; 6(12).
16. Diestre C, Martinez-Lorenzo Mj, Bosque A, Naval J, Larrad L, Anel A. Generation of rabbit antibodies against death ligands by cdna immunization. Journal of Immunological Methods. 2006; 317(1-2): 12-20. [DOI:10.1016/j.jim.2006.08.018]
17. Stiles BG, Garza AR, Ulrich RG, Boles JW. Mucosal Vaccination with Recombinantly Attenuated Staphylococcal Enterotoxin B and Protection in a Murine Model. Infection and Immunity. 2001; 69(4): doi: 10.1128/IAI.69.4.2031-2036.2001. [DOI:10.1128/IAI.69.4.2031-2036.2001]
18. Mulvey MR, Doupe M, Prout M, Leong C, Hizon R, Grossberndt A, et al. Staphylococcus aureus harbouring Enterotoxin A as a possible risk factor for multiple sclerosis exacerbations. Mult. Scler J. 2011; 17(4): 397-403. [DOI:10.1177/1352458510391343]
19. Jing Li, Jie Yang, Yu-wei Lu, Song Wu, Ming-rui Wang, Ji-min Zhu. Possible role of staphylococcal enterotoxin B in the pathogenesis of autoimmune diseases. Viral Immunology. 2015; 28(7): doi.org/10.1089/vim.2015.0017. [DOI:10.1089/vim.2015.0017]
20. Libbey JE, Cusick MF, Fujinami RS. Role of pathogens in multiple sclerosis. International Reviews of Immunology. 2013; 33(4): 1-18. [DOI:10.3109/08830185.2013.823422]
21. Torres BA, Kominsky S, Perrin GQ. Superantigens: the good, the bad, and the ugly. Exp Biol Med. 2001; 226: 164-76. [DOI:10.1177/153537020122600303]
22. Schiffenbauer J, Johnson HM, Butfiloski EJ. Staphylococcal enterotoxins can reactivate experimental allergic encephalomyelitis. Proc Natl Acad Sci USA. 1993; 90: 8543-6. [DOI:10.1073/pnas.90.18.8543]
23. Brocke S, Gaur A, Piercy C, Gautam A, Gijbels K, Fathman G, et al. Induction of relapsing paralysis in experimental autoimmune encephalomyelitis by bacterial superantigen. Nature. 1993; 365: 642-4. [DOI:10.1038/365642a0]
24. Kumar P, Kretzschmar B, Herold S, Nau R, Kreutzfeldt M, Schütze S, et al. Beneficial effect of chronic Staphylococcus aureus infection in a model of multiple sclerosis is mediated through the secretion of extracellular adherence protein. Journal of Neuroinflammation. 2015; 12-22. [DOI:10.1186/s12974-015-0241-8]
25. Mulvey MR, Doupe M, Prout M, Leong C, Hizon R, Grossberndt A, et al. Staphylococcus aureus arbouring Enterotoxin A as a possible risk factor for multiple sclerosis exacerbations. Mult. Scler. 2011; 4: 397-403. [DOI:10.1177/1352458510391343]
26. Singh BR, Evenson ML, Bergdoll MS. Structural analysis of staphylococcal enterotoxins B and C1 using circular dichroism and fluorescence spectroscopy. Biochemistry 1988; 27(24): 8735-41. [DOI:10.1021/bi00424a008]
27. Doenlen R, Krügel U, Wirth T, Riether C, Engler A, Prager G, et al. Electrical activity in rat cortico-limbic structures after single or repeated administration of lipopolysaccharide or staphylococcal enterotoxin B. Proc Biol Sci. 2011; 278(1713): 1864-72. [DOI:10.1098/rspb.2010.2040]
28. Serrats J, Sawchenko PE. CNS activational responses to staphylococcal enterotoxin B: T‐lymphocyte‐dependent immune challenge effects on stress‐related circuitry. J Comp Neurol. 2006; 495(2): 236-54. [DOI:10.1002/cne.20872]
29. Oshvandi K, Jokar M, Khatiban M, Keyani J, Yousefzadeh MR, Sultanian AR. the effect of self-care education based on teach back method on promotion of self care behaviors in type ii diabetic patients: a clinical trial study. Diabetes and Metabolism. 2014; 13(2).
30. Tommaso A di, de Magistris MT, Bugnoli M, Marsili I, Rappuoli R, Abrignani S. formaldehyde treatment of proteins can constrain presentation to t cells by limiting antigen processing. Infect Immun. 1994; 62(5): 1830-4. [DOI:10.1128/IAI.62.5.1830-1834.1994]
31. Coffman D, Zhu J, Roach J, Bavari S, Ulrich R, Giardina S. Production and Purification of A Recombinant Staphylococcal Enterotoxin B Vaccine Candidate Expressed in Escherichia Coli. Protein Expr Purif. 2002; 24(2): 302-12. [DOI:10.1006/prep.2001.1556]
32. Hu DL., Zhu G., Mori F., Omoe K., Okada M., Wakabayashi K, et al. Staphylococcal enterotoxin induces emesis through increasing serotonin release in intestine and it is downregulated by cannabinoid receptor 1. Cell Microbiol. 2007; 9: 2267-77. [DOI:10.1111/j.1462-5822.2007.00957.x]
33. Silverman SJ, Espeseth DA, Schantz EJ. Effect of Formaldehyde on The Immunochemical and Biological Activity of Staphylococcal Endotoxin B. J Bacteriol. 1969; 98(2): 437-42. [DOI:10.1128/JB.98.2.437-442.1969]
34. Alizadeh H, Madani R, Babaie M, Kavid N, Golchinfar F, Emami T. Preparation and purification of polyclonal antibodies against mycobacterium avium paratuberculosis antigens in rabbit. J Fasa Univ Med Sci. 2012; 2(3): 168-73.
35. Barazesh A, Majidi J, Fallah E, Jamali R, Khazanchi A, Abdolalizadeh J. Prodution of polyclonal antibody against giardia lamblia in rabbit. Ilam University of Medical Sciences. 2007; 14(4).
36. Arefpour Torabi MA, Olad GR, Nazarian G, Salimian J, Khodi S, Bagheripour MJ. Production and purification of polyclonal antibodies against diphtheria toxin. Applied Biotechnology Reports. 2014; 2(1): 67-72.
37. Eivazi S, Majidi J, Aghebati Maleki L, Abdolalizadeh J, Yousefi M, Ahmadi M, et al. Production and purification of a polyclonal antibody against purified mouse igg2b in rabbits towards designing mouse monoclonal isotyping kits. Adv Pharm Bull. 2015; 5(1).
38. Niedergang F, Hémar A, Hewitt CR, Owen MJ, Dautry-Varsat A, Alcover A. The staphylococcus aureus enterotoxin B superantigen induces specific T cell receptor down-regulation by increasing its internalization. J Biol Chem. 1995; 270: 12839-45. [DOI:10.1074/jbc.270.21.12839]
39. Irina V, Pinchuk Ellen J. Beswick and victor e. reyes. Staphylococcal Enterotoxins. Toxins. 2010; 2(8): 2177-97. [DOI:10.3390/toxins2082177]
40. Sadeghi J, Alizadeh N, Ahangar Oskouei M, Laghusi D, Savadi Oskouei D, Nikanfar M, et al. Frequency of superantigen encoding genes of Staphylococcus aureus isolates collected from multiple sclerosis (MS) patients and nasal carriers. Microb Pathog. 2019; 127: 316-9. [DOI:10.1016/j.micpath.2018.12.010]
41. Torres BA, Kominsky S, Perrin GQ, Hobeika AC, Johnson HM. Superantigens: the good, the bad, and the ugly. Exp Biol Med. 2001; 226(3): 164-76. [DOI:10.1177/153537020122600303]
42. Wang X, Wang BR, Zhang XJ, Duan XL, Guo X, Ju G. Fos expression in the rat brain after intraperitoneal injection of Staphylococcus enterotoxin B and the effect of vagotomy. Neurochem. Res. 2004; 29: 1667-74. [DOI:10.1023/B:NERE.0000035801.81825.2a]
43. Popoff MR, Poulain B. Bacterial toxins and the nervous system: neurotoxins and multipotential toxins interacting with neuronal cells. Toxins (Basel). 2010; 2(4): 683-737. [DOI:10.3390/toxins2040683]


XML   English Abstract   Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

Najmi Z, Ghasemi S, Ghalandari R, Sotoudehnejad Nematalahi F. Production and Evaluation of Anti-Mouse Polyclonal Antibody Against Enterotoxin B of Staphylococcus Aurous. Shefaye Khatam. 2020; 8 (2) :82-92
URL: http://shefayekhatam.ir/article-1-2097-fa.html

نجمی زینب، قاسمی سهیل، قلندری روح ا...، ستوده نژاد نعمت اللهی فتاح. تولید و بررسی آنتی‌بادی پلی‌کلونال موشی علیه انتروتوکسینB استافیلوکوکوس اورئوس. مجله علوم اعصاب شفای خاتم. 1399; 8 (2) :82-92

URL: http://shefayekhatam.ir/article-1-2097-fa.html



دوره 8، شماره 2 - ( بهار 1399 ) برگشت به فهرست نسخه ها
مجله علوم اعصاب شفای خاتم The Neuroscience Journal of Shefaye Khatam
Persian site map - English site map - Created in 0.06 seconds with 32 queries by YEKTAWEB 4140